傳統(tǒng)的液-液萃取方法使用分液漏斗,需要10-1000毫升液相(每種)。對于一步萃取,為了獲得更大的回收率(某一相大于99%),分配系數(shù)KD必須大于10,因?yàn)橄啾?Vo/Vaq)必須保持在0.1-10之間。在分液漏斗的大多數(shù)液-液萃取方法中,定量回收需要兩次或更多次萃取。以下公式:
E=1-[1/(1+KDV)]n.
在公式中,n是提取次數(shù)。如果某物質(zhì)的分配系數(shù)KD=5,兩相體積相等(V=1),則需要萃取3次(n=3),才能獲得889以上的回收率。每次提取都使用新鮮溶劑。一般來說,多次提取比一次提取具有更高的提取效率。
在色譜分析中,用不溶于水的有機(jī)溶劑從水相中提取有機(jī)物。常用的提取容器是分液漏斗。操作時(shí),應(yīng)選擇體積比液體樣品大一倍以上的分液漏斗,分液漏斗的活塞應(yīng)干燥并涂上一層薄薄的油脂。堵塞后,應(yīng)轉(zhuǎn)動活塞幾次,使油脂均勻分布,然后放在提取架上。關(guān)閉活塞,將含有有機(jī)物和萃取溶劑的水樣溶液從上端口依次倒入分液漏斗,塞住塞子。一般溶劑的體積約為樣品溶液的30%-35%。為了增加兩相之間的接觸,提高萃取效率,應(yīng)拆除分液漏斗進(jìn)行振蕩。一開始慢慢搖。搖晃幾次后,向上傾斜漏斗下口(向空處),打開活塞,讓多余的蒸汽逸出(也叫放氣)。然后活塞關(guān)閉并擺動。重復(fù)上述步驟,直到放氣時(shí)只有很小的壓力,劇烈搖動3-5min,然后將分液漏斗放回漏斗架上靜置。漏斗中的兩層液相完全分離后,打開上面的瓶塞,然后慢慢擰開活塞,從活塞中釋放下層液體。分離液體時(shí),必須盡可能分離干凈,有時(shí)兩相之間可能出現(xiàn)的一些絮狀物會立即釋放出來。然后從分液漏斗上口倒出上層液體,千萬不要讓它從活塞中流出,以免被殘留在漏斗頸部的一種液體污染。將水倒回分液漏斗,用新鮮溶劑提取。萃取次數(shù)取決于兩相的分配系數(shù),一般為3-5次。將所有提取物合并并通過加入合適的干燥劑干燥,干燥劑可用于色譜測定。如果濃度因子不夠,可以將提取物蒸發(fā)濃縮。